Cómo ejecutar un análisis de expresión diferencial RNA-seq masivo
Cuándo usarlo: Tienes FASTQ de extremo pareado, una referencia y una tabla de condiciones.
Requisitos previos
- Habilidad instalada — git clone https://github.com/jaechang-hits/SciAgent-Skills ~/.claude/skills/sciagent-skills
- Conda/mamba + computación — Usa un servidor Linux o HPC; macOS está bien para conjuntos de datos pequeños
Flujo
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Planifica la tuberíaPlanifica un flujo de trabajo RNA-seq ED masivo para 2 condiciones x 3 replicados con salmon + tximport + DESeq2. Emite archivos esperados por paso.✓ Copiado→ Lista de pasos con herramientas y salidas intermedias
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Ejecuta cuantificaciónEjecuta salmon quant para cada muestra; produce un script.✓ Copiado→ Script Bash con invocaciones salmon
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Análisis EDCarga cuantificaciones mediante tximport, ejecuta DESeq2, produce gráficos MA + volcán y una tabla de los 50 genes principales.✓ Copiado→ Script R + archivos de salida
Resultado: Una tabla ED + gráficos que puedas entregar a un PI o colaborador.
Errores comunes
- Desajuste entre referencia y GTF de anotación — Comprueba explícitamente los números de versión; salmon y DESeq2 pueden ejecutarse silenciosamente en IDs no coincidentes
- El filtrado de conteos bajos elimina la señal biológica — Usa filtrado independiente o aumenta el umbral gradualmente; no apliques filtrado genérico