كيفية تشغيل تحليل التعبير التفاضلي RNA-seq المجمع
متى تستخدمه: لديك FASTQ نهاية مقترنة، ومرجع، وجدول الحالة.
المتطلبات الأساسية
- تثبيت المهارة — git clone https://github.com/jaechang-hits/SciAgent-Skills ~/.claude/skills/sciagent-skills
- Conda/mamba + حسابات — استخدم خادم Linux أو HPC؛ macOS جيد للمجموعات الصغيرة
الخطوات
-
تخطيط خط الأنابيبPlan a bulk RNA-seq DE workflow for 2 conditions x 3 reps with salmon + tximport + DESeq2. Output expected files per step.✓ تم النسخ→ قائمة الخطوات مع الأدوات والمخرجات الوسيطة
-
تشغيل التكميمRun salmon quant for each sample; produce a script.✓ تم النسخ→ نص Bash مع استدعاءات salmon
-
تحليل DELoad quants via tximport, run DESeq2, produce MA + volcano plots and a top-50 gene table.✓ تم النسخ→ نص R + ملفات الإخراج
النتيجة: جدول DE + الرسوم البيانية التي يمكنك تسليمها إلى مدير المشروع أو متعاون.
المزالق
- عدم تطابق المرجع مقابل GTF التعليق التوضيحي — تحقق من أرقام الإصدارات بشكل صريح؛ يمكن لـ salmon و DESeq2 أن تعمل بصمت على معرّفات غير متطابقة
- تصفية العد المنخفض تزيل الإشارة البيولوجية — استخدم التصفية المستقلة أو رفع الحد تدريجياً؛ لا تستخدم تصفية شاملة